Студопедия

Главная страница Случайная страница

КАТЕГОРИИ:

АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника






Определение креатинина в сыворотке крови и моче






Оборудование: 1. Штатив с пробирками.
  2. Пипетки на 1 мл и 5 мл.
  3. Мерная пробирка на 10 мл.
  3. КФК.
  4. Кюветы на 1 см.
  5. Центрифуга.
  6. Центрифужные пробирки.
Реактивы: 1. Трихлоруксусная кислота (ТХУ).
  2. Пикриновая кислота.
  3. Едкий натр (NaOH).
  4. Стандартный раствор креатинина (177 мкмоль/л).
  5. Дистиллированная вода.
  6. Сыворотка.
  7. Моча, разведенная в 100 раз

Принцип метода. В щелочной среде креатинин реагирует с пикриновой кислотой, образуя оранжево-красные соединения, интенсивность окраски которых определяют колориметрически.

Ход работы. В четыре пробирки смешать реактивы по схеме:

№ пробирки        
Отмерить, мл Опытная сыв-ка Опытная моча Стандарт Контроль
Сыворотка 0, 5 - - -
Разведенная моча - 0, 5 - -
Дист. вода 1, 0 0, 25 0, 5 0, 75
ТХУ 0, 5 0, 25 0, 25 0, 25
Стандартный р-р креатинина - - 0, 25 -

 

Реактивы (мл) Опытная проба Стандарт Контроль
Сыворотка 0, 5 ---- ----
Дист. Вода 1, 0 1, 0 1, 5
ТХУ 0, 5 0, 5 0, 5
Стандартный р-р (конц. 177 мкмоль/л) ---- 0, 5 ----

Через 5 минут содержимое пробирки №1 перенести в центрифужную пробирку и центрифугировать при 3000 об/мин в течение 5 минут. 1мл надосадочной жидкости внести в чистую пробирку (будет №1). В каждую пробу (пробирки № 1, 2, 3, 4) добавить по 0, 5 мл пикриновой кислоты и по 0, 5 мл едкого натра. Перемешать и оставить на 20 минут при комнатной температуре. Колориметрирование проводить против контрольной пробы при зеленом светофильтре в кюветах толщиной 0, 5см.

Расчет концентрации креатинина проводят по обычной формуле. Для мочи полученный результат умножают на 50 (коэффициент пересчета).

Содержание креатинина в суточной моче определяют по формуле:

С*1, 5/1000 = ммоль/сутки, где

С – концентрация креатинина в моче в мкмоль/л, 1, 5 – суточный диурез в литрах, 1000 – коэффициент перевода мкмоль в ммоль.

Норма креатинина в сыворотке крови – 53-106 мкмоль/л, в суточной моче – 4, 4-17, 6 ммоль/сутки.

Клиренс (коэффициент очищения) по креатинину рассчитывают по формуле:

(креатинин в моче/креатинин в крови)*1, 07, где

1, 07 – минутный диурез.

В норме клиренс по креатинину – 80-120 мл/мин.

Диагностическое значение определения креатинина:

Определение креатинина проводят для исследования функции почек. Содержание его в сыворотке крови увеличивается при значительном ухудшении функции почек. Креатининемия наблюдается также при закупорке мочевых путей, кишечной непроходимости, тяжелом диабете, механической желтухе, гиперфункции надпочечников, голодании. Увеличение креатинина в моче наблюдается при усиленной мышечной работе, лихорадочных состояниях, пневмонии, выраженной недостаточной функции печени.

Понижение креатинина в моче – при мышечной атрофии, голодании, дегенерации почек, лейкемии.

Расчет клиренса креатинина позволяет получить информацию об интенсивности основных функций нефронофильтрации, реабсорбции, секреции и почечном кровообращении.

Вопросы к защите лабораторной работы:

1. Принцип определения мочевины крови.

2. В каких случаях повышается концентрация мочевины в крови?

3. В каких случаях снижается концентрация мочевины в крови?

4. Какие ферменты синтеза мочевины могут быть использованы для диагностики патологий печени и почему?

5. Принцип метода определения креатинина в сыворотке крови.

6. Что такое клиренс и как он рассчитывается?

7. Почему расчет клиренса по кратинину является хорошим тестом фильтрационной способности почек?

8. Для диагностики каких заболеваний используется определение активности креатинкиназы и почему?

5.4. Итоговый контроль знаний:

- вопросы по теме занятия:

1. Назовите источники аммиака.

2. Почему аммиак токсичен?

3. Как аммиак обезвреживается в клетках?

4. Назовите транспортные формы аммиака в крови. Где и как они образуются?

5. Какие вещества необходимы для синтеза мочевины?

6. Где локализован синтез мочевины?

7. Сколько макроэргических связей необходимо расщепить для синтеза одной молекулы мочевины?

8. В каком виде поставляется аммиак в процесс синтеза мочевины?

9. Сколько молекул аммиака связано в одной молекуле мочевины?

10. Почему определение активности орнитинкарбамоилфосфаттрансферазы может служить диагностическим тестом при заболеваниях печени?

11. Какова взаимосвязь цикла Кребса и процесса синтеза мочевины?

12. Напишите схему синтеза креатина.

13. В каких тканях и во сколько стадий происходит синтез креатинфосфата?

14. Какое значение имеет креатинфосфат для жизнедеятельности организма?

15. При каких заболеваниях увеличивается активность креатинкиназы в крови?

16. Что такое креатинин?

17. Для диагностики каких заболеваний определяют содержание креатинина в крови и моче?

18. Дайте понятие о клиренсе.

19. Почему клиренс определяют по мочевине и креатинину?

20. Какое значение в организме имеет метионин?

21. Какое значение в организме имеет глицин?

- ситуационные задачи:

1. При исследовании мочи новорожденного обнаружена фенилпировиноградная кислота. О каком заболевании может идти речь? Возможен ли благоприятный исход при своевременном вмешательстве врача?

2. При обследовании больного обнаружено резкое увеличение отношения АсАТ/АлАТ. Какое заболевание у данного больного и активность какого фермента следует определить дополнительно для уточнения диагноза?

 

3. На аммиачном производстве произошла авария с розливом аммиака. Нескольких рабочих доставили в реанимацию в бессознательном состоянии. Объясните, почему рабочие потеряли сознание?

 

ТЕСТЫ ДЛЯ КОНТРОЛЯ КОНЕЧНОГО УРОВНЯ ЗНАНИЙ

 

1. ПРЯМЫМИ ПРЕДШЕСТВЕННИКАМИ АЗОТА МОЧЕВИНЫ ПРИ ЕЕ СИНТЕЗЕ В ОРНИТИНОВОМ ЦИКЛЕ ЯВЛЯЮТСЯ

1) аммиак

2) амидный азот глутамина

3) аминогруппа аспартата

4) аминогруппа орнитина

 

2. В НЕРАБОТАЮЩЕЙ МЫШЦЕ ЭНЕРГИЯ НАКАПЛИВАЕТСЯ В ФОРМЕ

1) жира

2) креатинфосфата

3) АТФ

4) сукцината

 

3. ДЛЯ СИНТЕЗА КРЕАТИНА ТРЕБУЮТСЯ

1) аланин

2) S-аденозилметионин

3) лейцин

4) глюкоза

 

4. В ПРОЦЕССЕ СИНТЕЗА МОЧЕВИНЫ ЭНЕРГИЯ АТФ ТРЕБУЕТСЯ В ОБРАЗОВАНИИ

1) аргинина

2) карбамоилфосфата

3) орнитина

4) фумарата

 

5.ОПРЕДЕЛЕНИЕ КЛИРЕНСА ПОЗВОЛЯЕТ СУДИТЬ О ФУНКЦИИ

1) почек

2) печени

3) мочевого пузыря

4) поджелудочной железы

6. Домашнее задание для уяснения темы занятия (см. контрольные вопросы, тестовые задания и ситуационные задачи занятия №16).

7. Рекомендации по выполнению НИРС, в том числе список тем, предлагаемых кафедрой:

Подготовить обучающую программу по циклу синтеза мочевины.

 

 


Поделиться с друзьями:

mylektsii.su - Мои Лекции - 2015-2024 год. (0.01 сек.)Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав Пожаловаться на материал